TAE (50x stężony, Tris, Octane, EDTA)
Bufor TAE – przeznaczenie
TAE jest buforem używanym do elektroforezy w żelach agarozowych kwasów nukleinowych DNA i RNA. Zalecany jest w sytuacji, kiedy konieczne jest wycięcie z żelu fragmentu DNA (DNA gel-out).
Boran zawarty w TBE jest silnym inhibitorem enzymów, m.in. polimerazy DNA. Bufor TAE pozwala na lepszy rozdział fragmentów DNA powyżej 2 kpz.
Przygotowanie TAE (objętość 1 litra)
Dodaj do objętości 900 ml destylowanej lub podwójnie destylowanej wody:
242 g Tris (pH 8.3)
57.1 ml lodowatego kwasu octowego (CH3COOH)
18,6 g EDTA/100 ml 0,5 M EDTA (pH 8,0)
Po dodaniu odczynników uzupełnij destylowaną lub podwójnie destylowana wodą do objętości 1 litra. Bufor TAE należy przechowywać w temp. pokojowej lub +4 st. Celsjusza.
TAE – wskazówki
Przed użyciem stężony bufor TAE powinien być rozcieńczony do stężenia roboczego 1X. Bufor roboczy (1x) – 40mM Tris-octan oraz 1mM EDTA.
